Так, согласно отчету Европейского общества по трансплантации стволовых клеток , начиная с 2012 года количество трансплантаций стволовых клеток полученных из пуповинной крови снижается. Пуповинная кровь в качестве источника стволовых клеток для трансплантации уступила лидерство трансплантациям от взрослого донора.


Данный тренд обусловлен тем, что п олучить необходимое количество стволовых клеток у взрослого донора достаточно просто - об этой процедуре я рассказывал в своем .

Однако банки пуповинной крови продолжают наращивать объемы заготовки пуповинной крови на коммерческой основе. Стоимость услуг данных банков составляет 70 000 - 120 000 рублей за заготовку клеток и еще по 5 000 - 7 000 за каждый год хранения. Так вот, если уж вы хотите застраховать своего ребенка от тяжелого заболевания, то за эти же деньги в страховой компании вам предложат страховку от любого критического заболевания на долгие годы, а не на три первых года жизни. При этом страховка сможет покрыть все лечение, в то время как трансплантация клеток пуповинной крови - это только восстановление кроветворения после высокодозной химиотерапии, которая сама по себе стоит в несколько раз дороже самого трансплантата и применима лишь при нескольких редких заболеваниях крови.

Радикальным методом лечения многих тяжелых гематологических болезней является , которые выделяют из ткани костного мозга или крови. Осуществить его возможно путем поиска подходящего донора, что довольно не просто. Вероятность существования неродственного донора, совместимого по HLA-антигенному составу, составляет 1:100000. Для этого необходимы целые регистры типированных доноров, исчисляемые несколькими сотнями тысяч человек. Частично решить эту проблему помогает заготовка пуповинной крови.

Клиническое использование

Кровь, полученная из плаценты, является богатым источником гемопоэтических клеток. Концентрация колониеобразующих единиц в ней значительно превышает их количество в крови взрослого человека даже после стимуляции факторами роста. Она приближается по своему составу к костномозговой ткани. Поэтому стволовые клетки, содержащиеся в пуповинной крови, могут успешно применяться в гематологии для лечения следующих заболеваний:

• миелодиспластические синдромы;
• некоторые врожденные заболевания ( , наследственные гемоглобинопатии, синдром Барра и др.).

Трансплантация гемопоэтических клеток, полученных из плацентарной крови, является перспективным направлением в медицине, которое уже применяется в неврологии (последствия травм, дегенеративные заболевания нервной системы), ревматологии (диффузные ), онкологии и других отраслях.

Эффективность такого лечения определяется:

• своевременностью диагностики и лечения заболевания;
• степенью гистосовместимости (по системе HLA) донора и реципиента;
• возрастом больного (дает хорошие результаты у детей младше 5 лет);
• количеством пересаженных стволовых клеток (если их мало, то повышается риск рецидива патологического процесса или несостоятельности трансплантата).

Заготовка

Пуповинную кровь получают во время родов через естественные родовые пути или путем кесарева сечения. На этапе планирования процедуры беременную женщину всесторонне обследуют и исключают у нее заболевания инфекционной природы ( , и др.).

Готовясь к родам, в асептических условиях подготавливают систему для забора крови. Она состоит из специального контейнера с гемоконсервантом и устройством для взятия крови.

При нормальных родах через естественные родовые пути забор крови может осуществляться в двух вариантах:

• Если плацента находится в полости матки и еще не отделилась, то эксфузия крови выполняется после наложения зажима на пупочный канатик и отделения новорожденного от плодного места. Для этого пуповину тщательно обрабатывают растворами антисептиков, после чего производят пункцию пупочной вены, располагая емкость для сбора материала на 50-70 см ниже живота роженицы, чтобы кровь стекала в нее самопроизвольно.
• Если плацента уже выделена из полости матки, то ее располагают на специальной рамке плодной частью книзу, затем также обрабатывают и пунктируют вену пупочного канатика, после чего получают кровь в контейнер.

Из артерии пупочного канатика дополнительно берется 10 мл крови для первичного этапа обследования на принадлежность к группе крови и скрытые инфекции.

После окончания процедуры контейнер отсоединяют и транспортируют в банк пуповинной крови в специальном холодильнике или дополнительном контейнере, защищенном от перепада температур. При этом длительность хранения крови с гемоконсервантом до ее фракционирования не должна превышать 24 часов. Иначе стволовые клетки гибнут.

Хранение стволовых клеток

Выделение гемопоэтических клеток из пуповинной крови проводится в асептических условиях.

• Для этого кровь подвергается центрифугированию на высоких оборотах, в результате чего от нее отделяется плазма.
• После этого приступают к осаждению эритроцитов путем добавления седиментирующего вещества (желатин, гидроксиэтилкрахмал).
• Полученную клеточную взвесь смешивают с физиологическим раствором и дважды центрифугируют.
• Затем с помощью шприца отделяют клеточный осадок и подготавливают его к заморозке и длительному хранению.

Полученные из пуповинной крови стволовые клетки хранятся при низких температурах в замороженном состоянии:

• в холодильных камерах с температурой -80 градусов (до 6 месяцев);
• в парах жидкого азота при температуре -150 градусов (несколько лет);
• в емкостях с жидким азотом и температурой -196 градусов (более 20 лет).

Для замораживания клеточной взвеси ее предварительно охлаждают до +4 градусов на ледяной бане или в условиях холодильника. Затем шприцом набирают эту взвесь и переносят ее в мешок для консервирования, добавляя по каплям ограждающий раствор, после чего мешок запаивается и помещается в специальный аппарат для программного замораживания. При этом сам процесс осуществляется по четырехступенчатой программе, что позволяет сохранить жизнеспособность клеток в течение длительного времени.

Для использования замороженных образцов стволовых клеток непосредственно перед трансфузией производится медленное размораживание клеточной взвеси на водяной бане с температурой +40 градусов. После тщательного перемешивания выполняется исследование на сохранность клеток и их жизнеспособность.

Лабораторное тестирование

Применение в клинической практике крови, полученной из пуповины, требует специального тестирования в условиях лаборатории. Это позволяет определить принадлежность по HLA-системе, оценить качество препарата и выявить потенциальную возможность заражения инфекционными заболеваниями.

Перечень необходимых лабораторных анализов включает:

• определение объема пуповинной крови и содержания в нем клеточных элементов (стволовых клеток, лейкоцитов, эритроцитов);
• анализ крови на маркеры вирусных гепатитов;
• биохимическое исследование крови ();
• выявление антител к ВИЧ, бледной трепонеме, ;
• посев крови на стерильность;
• определение HLA-генотипа, группы крови по системе АВ0 и резус-фактору.

Для проведения всех исследований в полном объеме необходимо около 10 мл крови. Из них 4 мл сразу берут для тестирования, а остальные 6 мл центрифугируют и замораживают, после чего снова исследуют. Это дает возможность оценить качество трансплантата и прогнозировать время приживления кроветворных клеток в организме больного.

Пуповинную кровь для исследований используют очень экономно с целью минимизации потерь гемопоэтических клеток.

• Определение групповой принадлежности, HLA-фенотипа, биохимических показателей производится в порции крови, взятой из артерии пуповины.
• Бактериологическое исследование осуществляется в оставшейся после центрифугирования эритроцитарной массе.
• Серологические исследования сыворотки крови с целью выявления инфекций проводят с использованием плазмы, полученной в процессе фракционирования.
• Оценка концентрации клеток-предшественников гемопоэза производится в клеточном осадке, полученном путем разделения крови на фракции.

Преимущества и недостатки использования пуповинной крови

В настоящее время многие родители задумываются о том, стоит ли заготавливать пуповинную кровь ребенка, важно это или нет? Для того чтобы ответить на эти вопросы, рассмотрим преимущества этого метода лечения.

1. Процедура является абсолютно безопасной (не наносит вред здоровью матери и ребенка).
2. Не требует дополнительного обезболивания.
3. Имеет низкий риск заражения инфекционными заболеваниями.
4. Предоставляет возможность длительного хранения гемопоэтических клеток.
5. Обеспечивает биологическое страхование жизни ребенка при развитии у него тяжелых заболеваний (особенно кроветворной системы).

Однако существуют и недостатки применения пуповинной крови как источника стволовых клеток.

1. Основным из них является относительно небольшой объем получаемого материала и потери его при заготовке и лабораторном тестировании.
2. Еще одним недостатком этой процедуры является ее высокая стоимость при небольшой вероятности применения у ребенка. Однако она малосопоставима со стоимостью пересадки костного мозга, которая исчисляется десятками тысяч долларов.

В настоящее время в России и других странах существуют специальные банки пуповинной крови. Это могут быть частные и государственные структуры. Последние преследуют цели создать определенный запас биологического материала, который может использоваться для научных исследований и лечения больных.

Частные банки занимаются хранением именных образцов, которыми можно воспользоваться в случае болезни. Они предлагают своим клиентам различные тарифы:

• Средняя стоимость забора и хранения пуповинной крови в Гемабанке составляет 65000 рублей, отдельно оплачивается каждый год хранения (7000 рублей).
• В банке стволовых клеток «Криоцентр» пакет хранения стволовых клеток (25 лет) имеет общую стоимость около 230 000 рублей.

Среди множества мероприятий, которые предлагают беременным, особняком стоит забор и хранение пуповинной крови. Суть процедуры в следующем: сразу после родов из пуповины получают кровь, которая принадлежала плоду. Выделенные из неё клетки замораживают и хранят в специальном банке до тех пор, пока они не потребуются.

Ценность пуповинной крови заключается в том, что она содержит биологически активные стволовые клетки, и поэтому хорошо подходит для нужд клеточной терапии и трансплантологии.

Банки пуповинной крови делятся на именные - в них хранят кровь тех детей, родители которых заключили соответствующий контракт, и банки-регистры, создаваемые на основе безвозмездного донорства. Любой человек, которому для лечения требуется пуповинная кровь, может обратиться в банк-регистр. Однако проблема заключается в том, что подобрать подходящую кровь бывает очень трудно: необходимо соответствие по основным антигенным системам, иначе чужеродные клетки вызовут у пациента реакцию отторжения. К сожалению, в России коллекция у банков-регистров достаточно скудна, поэтому приходится искать кровь часто за рубежом, на что требуются время (от 6 месяцев до года) и немалые деньги (от 15000 Евро). Возможный выход из сложившейся ситуации - запасать собственную кровь ещё при рождении: она будет всегда доступна и в случае необходимости идеально подойдёт для трансплантации.

Процедура сохранения пуповинной крови хорошо отработана и на контрактной основе доступна любым родителям - только мало кто о ней слышал. Мы решили узнать поподробнее о такой возможности и обратились за сведениями в ведущий именной банк пуповинной крови Банк стволовых клеток «КриоЦентр», созданный на базе Научного Центра Акушерства, Гинекологии и Перинатологии.

Чем ценна пуповинная кровь?

Пуповинная кровь богата кроветворными стволовыми клетками, т.е. клетками-родоначальниками элементов крови. Их используют для трансплантации, когда собственное кроветворение нарушается: при лейкозах, тяжелых нарушениях иммунной системы и других заболеваниях. Противники хранения пуповинной крови резонно замечают, что такие патологии, хоть и являются жизнеугрожающими, встречаются редко. Однако, с другой стороны, в перспективе предполагается, что стволовые клетки будут использоваться по более широким показаниям. В любом случае, уже сейчас успешно проведены тысячи трансплантаций пуповинной крови, спасшие жизнь больным с ранее считавшимися неизлечимыми заболеваниями.

Пуповинная кровь - не единственный источник кроветворных клеток, но у неё есть ряд преимуществ: лёгкое и безопасное получение, молодость, а потому высокая функциональная активность стволовых клеток и иммунологическая совместимость. Для того же, чтобы воспользоваться заранее заготовленной кровью, требуется от нескольких дней до нескольких недель.

Пуповинную кровь новорожденного можно использовать для лечения других членов семьи. Документированы успешные случаи пересадки родителям, бабушкам и дедушкам и даже двоюродным братьям и сестрам. Однако наибольшие шансы оказаться совместимыми имеют дети одних многодетных родителей.

Сохранять или не сохранять пуповинную кровь, каждые родители решают в зависимости от своего материального положения и от того, насколько нужной они считают эту процедуру. Следует учитывать, что забор пуповинной крови особенно показан для тех детей, в чьих семьях встречались тяжелые заболевания кроветворной системы или уже есть больные дети, которых можно вылечить пуповинной кровью брата или сестры, а также этническим меньшинствам, которым трудно найти совместимого донора в международных банках-регистрах.

Как проводится забор пуповинной крови?

После рождения ребёнка акушерка перевязывает и пересекает пуповину. Затем материнский конец пуповины обрабатывают стерильным раствором и с помощью иглы забирают из пупочной вены кровь в специальный стерильный контейнер с антикоагулянтом. Пуповинной крови обычно немного, около 80 мл, поэтому целесообразно дополнительно извлекать из плаценты всю имеющуюся в ней кровь.

Процедура абсолютно безболезненна и занимает несколько минут. Её можно провести как при нормальных родах, так и в ходе кесарева сечения. Более того, при многоплодной беременности технологически возможно собрать пуповинную кровь каждого из детей.

Как выделяют стволовые клетки?

Не позднее чем через сутки после забора образец попадает в банк. Прежде чем отправлять кровь на хранение, её нужно тщательно обработать. Вначале образец проверяют на инфекции, определяют группу крови и резус-фактор, затем «процессируют», то есть получают концентрат стволовых клеток. С помощью специального прибора удаляют избыток плазмы и практически все эритроциты. Полученный концентрат анализируют под микроскопом для определения жизнеспособности клеток. Следующий этап – заморозка клеток, которая не должна привести к их гибели. С этой целью добавляют криопротектор, предотвращающий образование «острых, рвущих клетки» кристаллов льда. Затем концентрат плавно замораживают до -90°С и помещают на карантинное хранение (пары жидкого азота, -150°С), где они находятся до того момента, пока не будут готовы результаты всех анализов. Наконец, приблизительно через 20 дней образцы переносят в постоянное хранилище (жидкий азот, -196°С).

На выходе получается от 5 до 7 пробирок концентрата. Помимо основных пробирок, заготавливают несколько пробирок-спутников - они содержат минимальный объём плазмы и клеток, достаточный для проведения анализа. Например, если владелец крови захочет использовать её для своего родственника и потребуется сделать проверку на совместимость, не надо будет размораживать основной образец - достаточно будет извлечь пробирку-спутник.

Как хранят стволовые клетки?

Клетки пуповинной крови хранятся в особых ёмкостях с жидким азотом в отдельной комнате, расположенной глубоко под землёй. Низкую температуру поддерживает специальная автоматизированная система, непрерывно контролирующая уровень жидкого азота. Она будет работать даже в случае отключения центрального электроснабжения. Банк пуповинной крови круглосуточно охраняется.

Исследования показывают, что в таком состоянии клетки остаются практически сохранными на протяжении многих лет. Уже сейчас не вызывает сомнения, что они не теряют своих свойств за 15-17 лет. Теоретически замороженные клетки могут храниться бесконечно долго.

Кому принадлежат стволовые клетки?

До совершеннолетия ребенка запас клеток пуповинной крови принадлежит его родителю или тому, кто указан в договоре хранения. После совершеннолетия сам ребёнок становится владельцем.

Сколько стоит договор?

За то, чтобы забрать, выделить и заморозить клетки пуповинной крови, придётся однократно заплатить около в 2000 Евро. В дальнейшем хранение образца обойдется в 3000 рублей в год (сумма прописывается в договоре и в последующем не меняется).

Что нужно сделать, если Вы хотите сохранить пуповинную кровь?

На любом сроке беременности нужно прийти в банк пуповинной крови, сдать анализы на инфекции и заключить договор. Затем сотрудники банка заранее доставят в роддом именной комплект с уникальным штрих-кодом, договорятся с врачом и акушеркой, обеспечат забор и доставку крови в банк, где из неё будут выделены стволовые клетки.

Не важно, предполагаются ли платные или бесплатные роды либо же кесарево сечение. Если женщина доставлена скорой помощью со схватками в ближайший роддом, следует позвонить по круглосуточному телефону и сообщить своё местонахождение - сотрудники банка договорятся с врачами.

Очень многие родители все чаще и чаще задаются вопросом, стоит ли сохранять стволовые клетки пуповинной крови младенца. Ведь ведущие акушеры-гинекологи и многие звездные мамочки советуют будущим родителям сохранить этот считающийся поистине уникальным естественный биоматериал в качестве дополнительной страховки для ребенка.

Пуповинная кровь — ценный биоматериал

Для начала разберемся, что же такое пуповинная кровь (ПК) и для чего ее нужно сохранять. Пуповинная кровь — это кровь, которая собирается из пуповины и плаценты сразу же после рождения ребенка.

Особенность этого биоматериала заключается в том, что в нем содержатся здоровые гемопоэтические стволовые клетки (СК). Они намного моложе и активнее однотипных клеток из костного мозга, т. к. сохранены в самом начале жизни. Подтверждение тому — множество научных исследований за последние тридцать лет. Этот ценный (точнее, бесценный, учитывая далеко не до конца изученные возможности его применения в медицине) биоматериал используется в лечении более 85 заболеваний, а именно — болезней крови, иммунной системы, аутизма, ДЦП, а также ряда наследственных заболеваний.

Стоит отметить, что сохраненная ПК подойдет не только самому ребенку, но и обеспечит вполне надежную биологическую страховку его близким, родителям, родным братьям и сестрам. Многие врачи сегодня настоятельно рекомендуют сохранять стволовые клетки тем семьям, у которых дети принадлежат к редким этническим группам и существует их генетическая предрасположенность к определенным заболеваниям. А также тем, у кого старшим детям показана трансплантация с использованием СК.

Сбор пуповинной крови

Пуповинная кровь собирается после того, как ребенок родился, а пуповина перерезана, поэтому процедура совершенно безболезненна и безопасна как для малыша, так и для его матери. Сбор крови занимает максимум 5 минут. Причем собирают ее как при естественных родах, так и при кесаревом сечении. Для этого врач помещает иглу в пупочную вену, по которой кровь переливается в специальный пакет с жидкостью, предотвращающей свертываемость. Обычно собирается от 80 до 120 мл крови.

Выделение стволовых клеток из пуповинной крови

После забора пуповинной крови следует этап сепарации и кровь подвергается поэтапной обработке. Кровь очищают от остатков плазмы, эритроцитов и большинства зрелых лейко­цитов и выделяют стволовые клетки. На сегодня существует три способа выделения: ручной, полуавтоматический и автоматический. Наиболее популярен второй способ. Пакет с кровью помещают в специальный прибор, к которому подключены три контейнера с трубочками. С помощью автоматического пресса по одной трубочке вверх перемещается плазма, по второй вниз спускаются эритроциты, а средний слой с образцом стволовых клеток остается в пакете, далее его запаивают и транспортируют в лабораторию. Стоит отметить, что содержание стволовых клеток в пуповинной крови относительно невелико - менее 1% от всех лейкоцитов. Обычно собирают 4-6% СК, но этого объема вполне достаточно для трансплантации взрослому человеку.

Хранение

Хранить пуповинную кровь допускается исключительно в специальных контейнерах и только в специализированных банках (не емкостях, разумеется, а медицинских организациях), с которыми семья заключает контракт еще до наступления родов. Пуповинная кровь собирается специально обученным персоналом родового отделения.

После того как биоматериал собран, контейнер в специальной упаковке в течение 36 часов доставляют автомобилем или самолетом в лабораторию, где его детально исследуют. ПК проходит тестирование на наличие инфекций, определение группы крови и резус-фактора. После этого она помещается в специальные криомешки или криопробирки и отправляется на бессрочное хранение в криохранилища. Точнее, в резервуар объемом 240 литров, заполненный жидким азотом для поддержания постоянной температуры (от -170ºС до -196ºС) хранящихся образцов. Такой формат хранения позволяет сберечь изначальные полезные свойства образца на неограниченный период времени.

Насколько популярны в России банки стволовых клеток

Но так ли эта услуга востребована в России? По данным Института стволовых клеток, на начало 2016 года на территории нашей страны работало 14 персональных банков пуповинной крови, в которых хранилось 55576 персональных образцов стволовых клеток. Причем самые крупные банки — Гемабанк и Криоцентр — функционируют на рынке медицинских услуг уже около 15 лет. Также Институт приводит динамику количества поступающих образцов ПК с 2009 по 2015 гг. Судя по этим данным, ежегодно в банки в среднем обращается 5600 человек. И только в 2012 году наблюдался рост продаж, когда было сохранено 7486 образцов СК. Многие связывают эти показатели с высоким ростом рождаемости в том году и активной PR-кампанией.

По сути, 55 тысяч — не такая уж большая цифра. Так почему же за 15 лет существования подобных банков нет большого спроса на эту услугу? Как показывают опросы, многие родители считают такую биостраховку слишком дорогой и неэффективной. “Зачем здоровому ребенку нужно сохранять пуповинную кровь? К тому же, медицина не стоит на месте, а прогрессирует, и в случае заболевания вылечить ребенка можно без использования стволовых клеток”, — вот наиболее распространенная формулировка среди сомневающихся.

Другие родители, услышав про сбор денег за хранение СК, сразу вспоминают финансовую пирамиду МММ, которая закончилась громким крахом с тысячами пострадавших людей. Есть и те, кто просто не доверяет условиям хранения стволовых клеток в России. Обратимся вновь к аналитическим данным Института и посмотрим, сколько людей вложили свои сбережения в здоровье ребенка и своих родственников и, как выяснилось, сделали это не зря. Согласно данным на 2016 год, было выдано 106 образцов ПК для лечения пациентов с диагнозами: нейробластома, анемия Фанкони, ювенильный миелолейкоз, ДЦП, синдром Швахмана-Даймонда.

Сколько стоит сбор пуповинной крови

За сбор, транспортировку и хранение биоматериала сроком на 5 лет Гемабанк берет от 84 тыс. рублей, за 10 лет сумма расходов составит 104 тыс. рублей, за 20 лет — 134 тыс. рублей.

В Криоцентре при заключении договора стоимость услуг обойдется в сумму от 59 до 69 тыс. рублей (в зависимости от того, в чем будет храниться биоматериал — в криомешке или в криопробирке), плюс 5,5/6 тыс. рублей за ежегодное хранение. К примеру, за 5 лет клиент необычного банка заплатит 86,5/99 тыс. рублей.

Список криобанков в России

По информации Института стволовых клеток человека в России работает 14 банков, которые оказывают услугу по персональному хранению пуповинной крови. Эти данные были опубликованы на сайте компании в июне 2016 года.

• Гемабанк
• ООО «Криоцентр»
• ГУП Самарской области «Поволжский Банк гемопоэтических клеток»
• Банк стволовых клеток пуповинной крови Перинатального медицинского центра
• ООО «Покровский банк стволовых клеток»
• Оренбургский банк стволовых клеток
• Банк Стволовых клеток пуповинной крови при Центральной клинической больнице управления делами президента (ЦКБ)
• ООО «Транс-Технологии»
• Банк стволовых клеток «СМ-Клиника»
• Ижевский Банк стволовых клеток
• Уфимский Банк стволовых клеток при клинике «Мать и Дитя»
• Банк стволовых клеток при Казанском государственном медицинском университете
• Казанский банк ПК при ФГУ
• Банк при ООО «НЕО-клиник» (г. Тюмень)